植物组织培养必须在什么条件下？

植物组织培养需要一定的场地、仪器设备，大致包括一系列实验室：如无菌室（接种的重要场所，面积不必很大，但必须保证密封和洁净）；化学实验室（是配制试剂和培养基的场所）；培养室（是试管苗的培养场所，内设培养架空调机等）；洗涤室（专门洗涤各种玻璃器皿的场所）；灭菌室（主要为培养基和玻璃器皿以及工具消毒灭菌的场所）和细胞学实验室（可以进行一系列的观察和分析等）。此外，还需要恒温箱、烘箱、冰箱、天平、酸度计、高压灭菌器、馏水发生器、显微镜等以及一些玻璃器皿（三角瓶、容量瓶、培养皿、烧杯、量筒等）。

这是现代生物技术的一种，操作必须是无菌无毒环境条件下进行。植物组织培养是根据植物细胞的全能性原理，采用科学操作流程，对植物幼嫩组织的细胞进行科学培养，每一个细胞都能形成一株新植物体，是一种无性繁殖。如果有细菌病毒破坏细胞，何谈繁殖新植物体。

植物组织培养中的愈伤组织是如何形成的以及再分化的？

植物组织培养中的愈伤组织是如何形成及再分化的？植物组织培养中使用的外植体一般是高度分化了的细胞，在植物体中是不会再分裂繁殖的，只是执行某种功能直至死亡。

这些细胞在培养基上培养时会由原来的分化状态，变成分生状态的细胞，分裂产生愈伤组织，这个过程称为脱分化（dedifferentiation）过程。这种转变在细胞的形态结构和生理生化上都会产生一系列变化。组织培养的研究结果表明分化细胞的脱分化需要两个条件，即创伤和外源激素。目前人们对于脱分化过程的本质还不清楚。分化细胞在细胞周期中是处于一种相对静止状态的细胞（G0期细胞），脱分化是要打破这种状态，使细胞进入细胞周期中的G1期，并沿着G1期→S期→G2期→M期的循环进行细胞分裂，形成愈伤组织。现在发现细胞周期受基因调控，一种称为编码细胞周期依赖性激酶CDK（cycilin dependent kinase）的基因和一种细胞周期蛋白（cyclin）可能与植物细胞脱分化的第一次分裂启动有关。那么，什么因素诱导细胞周期调控基因的作用，培养实践证明与外源激素有关。至于激素如何诱导以及诱导作用的过程目前仍不清楚，有待深入研究。分化细胞脱分化后细胞结构有两点明显的变化：一是在细胞内出现液泡蛋白；二是叶绿体转变成原质体。当细胞脱分化形成愈伤细胞后，经过一段时期的分裂，细胞群体变成不是一种细胞类型的均一群，又会产生分化，形成分生细胞或分生细胞团，由此再生成植株有两条途径：一是形成体细胞胚（功能类似于受精过程产生的胚），通过体细胞胚形成再生植株。二是走器官发生的途径再生植株，分生细胞在一定的诱导条件下重建芽的分生组织，分化出芽后再生根，成为完整的植株。

植物组织培养为什么要创设无菌环境？

组培，即组织培养。通俗的说，就是把植物的一部分（比如玉扇的花箭）单独取下来，通过各种激素让它重新长成完整的植物。

组织培养本身很简单，难的是在培养过程中不被各种细菌真菌影响，所以通常要在无菌环境培养，无菌环境一般是密闭的容器。等长到一定大小，从容器中取出，俗称出瓶。出瓶后，因为该植株是无菌环境长大的，可能无法适应自然环境，因此有良心的组培者会自己带一段时间，逐步适应外界环境，包括细菌，光照，逐渐减少营养液供应等。这个过程中会死掉一些苗。差不多一年后苗会适应外部环境，可以正常养了，这种苗被称为组培硬化苗。